دانلود مقاله بررسی گشت جنین درون شیشه و تاثیر محیط گشت و سطوح مختلف هورمونی ریز نمونه درگالزایی و ش

دانلود مقاله بررسی گشت جنین درون شیشه و تاثیر محیط گشت و سطوح مختلف هورمونی ریز نمونه درگالزایی و شاقه زایی گیاه باریچه

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 45

بررسی کشت جنین درون شیشه و تاثیر محیط کشت و سطوح مختلف هورمونی ریز نمونه درکالزایی و شاقه زایی گیاه باریچه

مقدمه

باریجه با نام انگلیسی Galbanum ، گیاه ارزشمند دارویی صنعتی از خانواده چتریان، بومی ایران بوده و از لحاظ پراکنش، در ارتفاعات شمال و غرب ایران به صورت طبیعی یافت می شود. این گیاه چند ساله و منو کارپیک بوده( در طول عمر خود تنها یک بار گل می دهد) و در چند سال اول رویش (7-5 سال) برگ های طوقه ای تولید می کند، در سال آخر رویش به ساقه می رود و گل و میوه نیز روی آن تشکیل می شود، سپس ریشه گیاه می پوسد و گیاه از بین می رود. ترکیبات آن عبارتند از 5/9 در صد اسانس، 5/93 درصد رزین، 27 در صد صمغ و اسانس آن دارای پینن، کادنین، کادی نول و والریناتدوبورنیل است. اثرات دارویی این گیاه از مدت ها پیش در طب سنتی کشورمان استفاده شده است. همین طور از لحاظ صنعتی دارای مصارف بسیار ارزشمندی است به طوری که در بازار کشورهای صنعتی خواهان زیادی دارد و شیرابه این گیاه از اقلام مهم صادراتی ایران محسوب می شود.

عصاره این گیاه دارای ترکیباتی است که می تواند در جهت تسکین سندروم محرومیت مورفین سودمند باشد. فعالیت ضد صرع روغن موجود در میوه و همین طور فعالیت ضد صرع و ضد تشنج بذر این گیاه بر روی موش ثابت شده است.

فعالیت بالای آنتی باکتریالی روغن موجود در این گیاه روی تمامی میکروارگان ها به جزPseudamonas aeroginosa ( در فعالیت کمتر) به اثبات رسیده است. با تجزیه GC/MS روغن میوه این گیاه، مشخص شده است که بتا پینن با 78/43 درصد، بیشترین ترکیب و پس از آن آلفا پبنن با 27/27 درصد و میرسن با 37/3 درصد از ترکیبات مهم روغن میوه محسوب می شوند. همین طور نشان داده دشه است که روغن موجود در این گیاه دارای خاصیت محدودکنندگی رشد در میکروارگانیسم ها است. ضمن این که میوه این گیاه پتانسیل استفاده به عنوان شوینده های آنتی باکتریال خوشبو را دارد.

در بررسی ترکیبات این گیاه ثابت شده است صمغ این گیاه می تواند به عنوان چسب های نامرئی برای چسباندن سنگ های قیمتی نظیر الماس و یا جواهرات استفاده شود، همین طور شیرابه آن در صنعت چاپ، نساجی و عطر سازی کاربرد دارد. لذا با در نظر گرفتن اهمیت گیاعه باریجه از نظر دارویی و صنعتی که آن را به عنوان یک مقوله صادراتی ارزشمن برای کشورمان معرفی می کند و از طرفی با توجه به ویژگی خاص گیاه مذکور به علت منوکارپیک بودن آن و دروه خواب طولانی بذر، تولید انبوه این گیاه با مشکل جدی مواجه است، ضمن این که با توجه به نتیجه تحقیقات سازمان جنگل ها و مراتع به دلیل برداشت نامناسب آن در مناطق رشد خودروی آن، خطر انقراض این گیاه مهم بومی ایران وجود دارد. لذا لزوم روش هایی برای به حداقل رساندن دوره خواب و جوانه زنی بذر را یک طرف و تکثیر و ریز ازدیادی این گیاه از طرف دیگر و همین طور افزایش میزان متابولیت های ثانویه آن هر چه بیشتر احساس می شود. بر این اساس چنین اسنتتاج می شود که بررسی این گیاه در حوزه مهندسی کشت بافت می تواند چه به عنوان یک روش منفرد و کاربردی برای تولید انبوه این گیاه و جلوگیری از انقراض آن و چه به عنوان یک قدم پایه و اساسی جهت ادامه تحقیقات و پژوهش ها در زمینه افزایش متابولیت های ثانویه، روشی موثر و مفید محسوب می شود. تحقیقات بر روی شکستن خواب بذر و جوانه زنی این گیاه نشان داده است که حداقل زمان لازم برای انجام آن، با استفاده از پیش تیمارهای مختلف 40 روز است. ضمن این که در بررسی مجلات و انتشارات معتبر داخلی و خارجی، گزارشی مبنی بر به کارگیری تکنیک های کشت بافت بر روی این گیاه یافت نشده است، به این خاطر در بررسی حاضر، تلاش شده است تا با استفاده از کشت جنین در محیطJn vitro ، زمان لازم برای شکستن خواب و جوانه زنی بذر این گیاه را به حداقل رسانده و با ایجاد گیاهچه کامل جهت تهیه ریز نمونه های مناسب برای القای کالوس، درنهایت با به کارگیری انواع محیط های کشت و سطوح هورمونی مختلف و ریز نمونه، کالزایی و ساقه زایی را در ارتباط با این گیاه بهینه کنیم.

مواد و روش ها

ضد عفونی و شکستن خواب بذر:

بذر گیاه F.gummosa ، از ارتفاعات استان مرکزی جمع آوری شدند. بذرها در ابتدا به مدت 48 ساعت به منظور نرم شدن بافت آندوسپرم اطراف جنین در زیر آب جاری قرار داده شدند. سپس بذرها به جهت پاک سازی نسبی آلودگی ها و نیز بازدارنده های احتمالی موجود بر پوشش بذر، توسط مایع صابون( حاوی آمیزه سورفکاتانت های آنیونی) و سپس با آب مقطر چندین بار شستشو داده شدند. سایر مراحل به منظور استریل کردن پوشش سطحی بذرها، در زیر لامینارفلو صورت گرفت. به این منظور، بذرها به صورت متوالی، به وسیله اتانول 70 درصد به مدت یک دقیقه و هیپوکلریت سدیم( Nacl با 5/2 درصد کلر فعال) به مدت 25 دقیقه با اضافه کردن چند قطره صابون مایع جهت افزایش جذب سطحی ضد عفونی شدند. سپس بذرها سه مرتبه با آب مقطر دوبار استریل شده، کاملاً شستشو داده شدند. محور جنینی توسط پنس و اسکارپل از پوشش بذر خارج شده و جنین ها در داخل لیوان های پیرکس حاوی محیط کشت های از قبل تهیه شده منتقل شدند و ظروف با نوار پارافیلم کاملاً ایزوله شدند و به اتاقک کشت با دمای 20 درجه سانتیگراد و شدت نور lux 3000 برای 16 ساعت دوره روشنایی انتقال داده شدند. محیط کشت های استفاده شده جهت جوانه زنی جنین شامل محیط MS با غلظت کامل ، 8/1 ، 4/1 از عناصر ماکرو و میکور همراه با با غلظت کامل ، 8/1 ، 4/1 از عناصر ماکرو و میکور همراه با 30 گرم در لیتر ساکاروز و 7 گرم در لیتر آگار در محیط 6-8/5 pH= بود که با استفاده از اتوکلاو و در دمای 121 درجه سانتیگراد و فشار 1 بار به مدت 20 دقیقه استریل شد.

انواه ریزنمونه و سطوح هورمونی جهت القای کالوس: پس از دستیابی به گیاهچه های با بنیه مناسب( گیاهچه 40-30 روزه) جهت تهیه ریز نمونه، از قسمت های مختلف گیاه: هیپوکوتیل، کوتیلدون ها، برگ اصلی، ریشه ، جنین کامل و جنین برش یافته، ریز نمونه تهیه شد تا در فاز کالزایی استفاده شوند.

شرایط مختلف جهت ساقه زایی:

کالوس های مناسب ( 35 -30 روزه) با منشاء ریشه، هیپوکوتیل و جنین برش یافته به محیط های باززایی شامل محیط کشت های پایه MS 4/1 همراه با 30 گرم

دانلود فایل >>>

سایر محصولات :
دانلود مقاله بررسی گشت جنین درون شیشه و تاثیر محیط گشت و سطوح مختلف هورمونی ریز نمونه درگالزایی و شاقه زایی گیاه باریچه

دانلود مقاله بررسی گشت...

دانلود پروژه جامع معرفی و کاربرد آنزیم دکستراناز

دانلود پروژه جامع معرفی و...

مقاله درباره ‏« طرح اولیه کارخانه و مدیریت ماده خام »‏

مقاله درباره ‏« طرح...

مقاله درباره «یک مدل تصادفی مربوط به تصمیمات استراتژیک»

مقاله درباره «یک مدل تصادفی...

مقاله درباره «سخنان ائمه ی معصومین ع درباره ی چگونه دعا کردن»